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睡菜醋酸乙酯部位化学成分及其神经保护作用研究(三)

来源:郑州天顺食品添加剂有限公司 发布时间:2021-09-22 09:18:03 关注: 0 次
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化学物质13:淡黄色针晶,EI-MS:m/z 624 ,化学式为C28H32O16。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.87 (1H, s, H-2′), 7.53 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-6′), 6.93 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5′), 6.41 (1H, s, H-8), 6.20 (1H, s, H-6), 5.45 (1H, d, J = 7.2 Hz, Glc, H-1′′), 4.44 (1H, br s, Rha, H-1′′′), 3.27 (3H, s, -OCH3), 0.99 (3H, d, J = 6.2 Hz, Rha C-6′′′), 0.99 (3H, d, J = 6.1 Hz, Rha, H-6′′′);13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 177.3 (C-4), 164.5 (C-7), 161.2 (C-5), 157.1 (C-2), 156.1 (C-9), 149.1 (C-4′), 147.5 (C-3′), 133.1 (C-3), 122.4 (C-6′), 121.2 (C-1′), 115.4 (C-5′), 113.4 (C-2′), 103.4 (C-10), 102.2 (C-1′′), 101.0 (C-1′′′), 99.6 (C-6), 94.4 (C-8), 76.7 (C-3′′), 76.1 (C-5′′), 74.5 (C-2′′), 72.1 (C-4′′′), 70.9 (C-2′′′), 70.7 (C-4′′), 70.3 (C-3′′′), 68.5 (C-5′′′), 67.2 (C-6′′), 56.0 (-OCH3), 18.0 (C-6′′′)。之上数据信息与文献资料报导一致,故评定该化学物质为原儿茶醛-3-O-芸香糖苷。

化学物质14:淡黄色粉末状,EI-MS:m/z 222 ,化学式为C13H18O3。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 7.01 (1H, d, J = 15.8 Hz, H-7), 6.46 (1H, d, J = 15.8 Hz, H-8), 5.97 (1H, m, H-4), 2.65 (1H, d, J = 17.8 Hz, H-2), 2.32 (3H, s, H-10), 1.91 (3H, d, J = 1.4 Hz, H-13), 1.07 (3H, s, H-12), 1.01 (3H, s, H-11);13C NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 199.2 (C-9), 199.0 (C-3), 163.1 (C-5), 147.0 (C-7), 130.4 (C-8), 126.5 (C-4), 78.4 (C-6), 49.2 (C-2), 41.7 (C-1), 26.3 (C-10), 23.4 (C-12), 22.1 (C-11), 17.5 (C-13)。之上数据信息与文献资料报导一致,故评定该化学物质为去氢吐叶醇。

化学物质15:没有颜色油状物质,EI-MS:m/z 224 ,化学式为C13H20O3。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 5.70 (1H, d, J = 15.5 Hz, H-7), 5.63 (1H, d, J = 15.5 Hz, H-8), 5.78 (1H, br s, H-4), 4.19 (1H, d, J = 6.4 Hz, H-9), 2.35 (1H, d, J = 16.6 Hz, H-2a), 2.05 (1H, d, J = 16.6 Hz, H-2b), 1.82 (3H, d, J = 1.2 Hz, H-13), 1.11 (3H, s, H-10), 0.93 (3H, s, H-11), 0.91 (3H, s, H-12);13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 197.5 (C-3), 164.5 (C-5), 135.8 (C-7), 127.9 (C-8), 125.5 (C-4), 77.9 (C-6), 65.9 (C-9), 49.4 (C-2), 41.0 (C-1), 24.1 (C-10), 23.7 (C-12), 23.1 (C-11), 19.0 (C-13)。之上数据信息与文献资料报导一致,故评定该化学物质为布卢门醇A。

化学物质16:乳白色不定形粉末状, EI-MS:m/z 196 ,化学式为C11H16O3。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 5.73 (1H, s, H-7), 4.18 (1H, m, H-3), 2.42 (1H, dt, J = 14.0, 2.8 Hz, H-4b), 2.01 (1H, dt, J = 14.5, 2.8 Hz, H-2b), 1.77 (3H, s, H-11), 1.75 (1H, dd, J = 14.0, 3.8 Hz, H-4a), 1.51 (1H, dd, J = 14.5, 3.8 Hz, H-2a), 1.47 (3H, s, H-9), 1.27 (3H, s, H-10);13C NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 185.4 (C-6), 174.4 (C-8), 113.2 (C-7), 88.8 (C-5), 67.2 (C-3), 47.7 (C-2), 46.3 (C-4), 37.2 (C-1), 30.7 (C-10), 27.1 (C-11), 26.6 (C-9)。之上数据信息与文献资料报导一致,故评定该化学物质为苏丹草内酯。

化学物质17:淡黄色油状物质,EI-MS:m/z 196 ,化学式为C12H20O2。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6.75 (1H, dd, J = 7.1, 1.3 Hz, H-3), 5.88 (1H, dd, J = 17.2, 10.7 Hz, H-7), 5.21 (1H, dd, J = 17.2, 1.4 Hz, H-8a), 5.08 (1H, dd, J = 10.7, 1.4Hz, H-8b), 3.71 (3H, s, -OCH3), 2.19 (2H, m, H-4), 1.81 (3H, s, H-10), 1.62 (2H, m, H-5), 1.28 (3H, s, H-9);13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ: 168.7 (C-1), 144.4 (C-7), 142.1 (C-3), 127.6 (C-2), 112.2 (C-8), 73.1 (C-6), 51.7 (-OCH3), 40.7 (C-5), 27.9 (C-9), 23.5 (C-4), 12.2 (C-10)。之上数据信息与文献资料报导一致,故评定该化学物质为 (E)-6-甲基-2,6-二甲基辛-2,7-二烯酸甲酯。

化学物质18:乳白色不定形粉末状,EI-MS:m/z 432 ,化学式为C19H28O11。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 7.15 (1H, d, J = 6.5 Hz, H-6), 7.03 (1H, d, J = 2.9 Hz, H-2), 6.95-7.02 (2H, m, H-4, 5), 4.86 (1H, d, J = 6.6 Hz, Glc, H-1′), 4.72 (1H, d, J = 1.2 Hz, Rha, H-1′′), 3.86 (3H, s, 3-OCH3), 1.21 (3H, d, J = 5.2 Hz, Rha, H-6′′);13C NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 150.7 (C-3), 147.8 (C-1), 124.3 (C-2), 122.2 (C-5), 118.5 (C-6), 113.5 (C-4), 102.5 (C-1′), 102.2 (C-1′′), 77.9 (C-3′), 76.8 (C-5′), 75.0 (C-2′), 74.1 (C-3′′), 72.3 (C-4′′), 72.2 (C-2′′), 71.5 (C-4′), 70.1 (C-5′′), 67.9 (C-6′), 56.8 (-OCH3), 17.9 (C-6′′)。之上数据信息与文献资料报导一致,故评定该化学物质为3-叔丁基甲酸-1-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖水苷。

化学物质19:淡黄色粉末状,EI-MS:m/z 134 ,化学式为C7H6N2O。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 10.71 (2H, s, 2×NH), 7.04-6.97 (4H, m, H-5, 6, 7, 8);13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 155.3 (C-2), 129.7 (C-4, 9), 120.4 (C-6, 7), 108.5 (C-5, 8)。之上数据信息与文献资料报导一致,故评定该化学物质为2-甲基苯并咪唑。

化学物质20:没有颜色纤维状结晶,EI-MS:m/z 182 ,化学式为C9H10O4。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9.79 (1H, s, 1-CHO), 7.13 (2H, s, H-2, 6), 3.91 (6H, s, 3, 5-OCH3);13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ: 190.5 (C-1), 147.1 (C-3, 5), 141.0 (C-4), 128.2 (C-1), 106.8 (C-6), 56.3 (3-OCH3, 5-OCH3)。之上数据信息与文献资料报导一致,故评定该化学物质为syringaldehyde。

化学物质21:没有颜色粉末状,EI-MS:m/z 138 ,化学式为C8H10O2。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 7.25~7.38 (5H, m, H-2, 3, 4, 5, 6), 4.67 (1H, dd, J = 7.4, 4.7 Hz, H-1′), 3.64 (2H, m, H-2′);13C NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 143.4 (C-1), 129.1 (C-3, 5), 128.4 (C-4), 127.5 (C-2, 6), 76.1 (C-1′), 68.5 (C-2′)。之上数据信息与文献资料报导一致,故评定该化学物质为1-苯基-1,2-乙二醇。

3.2 皮层酮对PC12体细胞受损的浓度值挑选

试验数据显示,皮层酮对PC12体细胞的损害水平随浓度值呈依赖感升高,450、550、650、750、850、950、1050、1150 μmol/L皮层酮功效PC12体细胞48 h后,其体细胞成活率各自为88.81±2.21%、77.07±4.21%、52.47±0.99%、44.78±0.95%、34.26±0.91%、26.96±3.36%、12.32±0.22%、13.21±2.02%。见图1。

本結果证实了一定含量的皮层酮的确能损害神经细胞,650 μmol/L皮层酮功效48 h对高分化PC12体细胞的抑制率贴近50%,故挑选以身体之外650 μmol/L皮层酮48 h功效于PC12体细胞以仿真模拟焦虑抑郁症神经元细胞损害情况,搭建抗焦虑活力成份身体之外体细胞挑选实体模型。

3.3 单个化学物质对皮层酮诱发的PC12体细胞受损的保障功效

试验数据显示,与650 μmol/L皮层酮组对比,化学物质1、2、3、4、5、7、9、10、11、15、16、17与650 μmol/L皮层酮一同功效PC12体细胞48 h后,体细胞成活率分別提升至92.29±2.31%、90.74±1.61%、91.62±1.83%、63.11±2.30%、61.01±1.21%、101.18±1.56%、105.23±1.11%、67.77±1.89%、65.66±1.06%、75.94±0.24%、64.39±1.47%、72.88±1.82%。苯丙素、木脂素、黄酮类、单萜类均有不一样水平的推动650 μmol/L诱发的PC12细胞的增殖的功效。在其中,4-O-现磨咖啡酰奎尼酸甲酯(1)、绿原酸甲酯(2)、绿原酸(3)、肿柄梅瑰苷(7)、苏式-(7R,8R)-愈创木基丙三醇-8-香草醛醚(9)推动650 μmol/L诱发的PC12细胞保护功效更为明显,试验結果见图2。

4 探讨

本分析从睡菜狼把草冰醋酸乙酯位置分离出来并评定获得2一个化学物质,包含3个苯丙素类(1~3),两个香豆素类(4和5),6个木脂素类(6~11),两个黄酮类化合物、多糖类(12和13),4个单萜类(14~17),4个别的类(18~21)。与此同时调查了2一个化学物质对皮层酮诱发损害的PC12体细胞的保障功效。结果显示化学物质1、2、3、7、9主要表现出明显的保障功效,化学物质4、5、10、11、15、16、17主要表现出中等水平的保障功效。

北五味子做为中国传统式的安神药,近些年的分析报导了北五味子木脂素具备明显的神经中枢抑止与安神助眠功效。合欢皮经科学研究也说明其抗焦虑的关键活力有效成分是 (-)-丁香花环氧树脂酚-4-O-β-D-葡萄糖水苷,其作用机制也许与抑止PC12体细胞膜蛋白细胞凋亡相关。事后将进一步探寻睡菜关键活力成份对皮层酮损害的PC12体细胞的抗细胞凋亡及维护作用机制,表明睡菜抗焦虑活力的药力物质条件。

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