1.2.3前解决

称量试品(肝部、肾脏功能、全身肌肉)2g(精准至0.01g)于50mL聚丙稀离心管架中，添加混和放射性核素内标切削液100μL，冉添加2mL水，涡流混和1min。添加0.2％硫酸-乙腈水溶液10mL，200r/min震荡10min，添加2g氧化钠，再震荡10min，5000r/min离心式5min。将所有上清液迁移至15mL聚丙稀离心管架并40℃氮吹至约5mL，添加100mgPSA、80mgC₁₈、30mgGCB，涡流混和1min，震荡10min，5000r/min离心式10min。取所有上清液至另一个15mL聚丙稀离心管架中，40℃氮吹至近干，1mL工业甲醇滴定剂，15000r/min离心式5min，上清液供上机操作测量。

为降低试验操作过程中产生的环境污染及环境影响，全过程尽量减少应用聚四氟乙烯容器而应用聚丙稀材料容器。

1.3方法学调查

1.3.1基质效应

本试验选用规范工作中溶液的配制：精确移取13种PFCs混和规范切削液、混和放射性核素内标切削液适当，用工业甲醇配置含量为0.05、0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、10ng/mL(放射性核素内标MPFOA浓度值为1.5ng/mL、MPFOS浓度值为3.0ng/mL)的全系列规范工作中水溶液。MPFOA是定量分析9种PFCAs的放射性核素内标，MPFOS是定量分析4种PFSAs的放射性核素内标配置的全系列规范工作中水溶液，依照规范工作中溶液的配制：精确移取13种PFCs混和规范切削液、混和放射性核素内标切削液适当，用工业甲醇配置含量为0.05、0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、10ng/mL(放射性核素内标MPFOA浓度值为1.5ng/mL、MPFOS浓度值为3.0ng/mL)的全系列规范工作中水溶液。MPFOA是定量分析9种PFCAs的放射性核素内标，MPFOS是定量分析4种PFSAs的放射性核素内标标准测量，制作标曲。与此同时，选择9种空缺试品栽培基质(生猪肉、牛肝、猪腰子、牛羊肉、猪肝、牛肾、牛肉、羊肝、羊腰)不用放射性核素内标依照称量试品(肝部、肾脏功能、全身肌肉)2g(精准至0.01g)于50mL聚丙稀离心管架中，添加混和放射性核素内标切削液100μL，冉添加2mL水，涡流混和1min。添加0.2％硫酸-乙腈水溶液10mL，200r/min震荡10min，添加2g氧化钠，再震荡10min，5000r/min离心式5min。将所有上清液迁移至15mL聚丙稀离心管架并40℃氮吹至约5mL，添加100mgPSA、80mgC₁₈、30mgGCB，涡流混和1min，震荡10min，5000r/min离心式10min。取所有上清液至另一个15mL聚丙稀离心管架中，40℃氮吹至近干，1mL工业甲醇滴定剂，15000r/min离心式5min，上清液供上机操作测量。

选用空缺栽培基质水溶液做为有机溶剂配置同样浓度值标准的系列产品栽培基质规范工作中水溶液，依照离子交换柱：AtlantisT3离子交换柱(2.1mmx150mm，3μm)；流动速度：0.3mL/min；柱温：40℃；进样量：10μL；流动性相：2.5mmol/L乙酸铵-甲醇溶液(A)(2.5mmol/L乙酸铵水溶液(B)；梯度方向过柱程序流程：0～3min，90％～40％B；3～12min，40％～10％B；12～14min，10％B；14～14.5min，10％-90％B；14.5～18min，90％B制作标曲。根据较为栽培基质标曲与有机溶剂规范曲线方程切线斜率的比率来分辨基质效应的危害。

1.3.2线形范同、方法检出限、定量限

0.05、0.1、0.5、l、2、5、10ng/mL系列产品规范工作中水溶液依照离子交换柱：AtlantisT3离子交换柱(2.1mmx150mm，3μm)；流动速度：0.3mL/min；柱温：40℃；进样量：10μL；流动性相：2.5mmol/L乙酸铵-甲醇溶液(A)(2.5mmol/L乙酸铵水溶液(B)；梯度方向过柱程序流程：0～3min，90％～40％B；3～12min，40％～10％B；12～14min，10％B；14～14.5min，10％-90％B；14.5～18min，90％B。电喷雾器离子源(ESI)；扫描仪方法：空气负离子扫描仪；检验方法：多反映检测(MRM)；喷雾器工作电压：3500V；蒸汽温度；290℃；正离子传送管溫度：270℃；鞘气流动速度：30arb；輔助气流动速度：10arb；二级撞击气：氩气；撞击气工作压力：1.5mTorr标准测量，放射性核素内标法定量分析，以每个总体目标物与相应的放射性核素内标物的峰断积比率为纵轴、以各总体目标物浓度值与与相应的放射性核素内标物的浓度值比率为横坐标轴，求线性方程及相关系数r。依照GB/T27417-2017《合格评定化学分析方法确认和验证指南》中5.4条文要求，在猪、牛、羊的肝部、肾脏功能、全身肌肉空缺试品栽培基质中加上预计最少可接纳浓度值0.15μg/kg，每一个试品平行测定10次，测算方法检出限(LOD)=0 3SD、方式定量限(LOQ)=0 10SD。

1.3.3利用率和精度

依照GB/T27404-2008《实验室质量控制规范食品理化检验要求》，针对未制订MRL限定的化学物质，利用率试验应在方式测量下限、普遍限定指标值、一个科学合理的加上浓度值三个水准开展。本试验选用在牛肝、猪肝、羊肝、猪腰子、牛肾、羊。肾、生猪肉、牛羊肉、牛肉9个不一样栽培基质空缺试品中加上0.2、1和2μg/kg三个浓度值，每一个浓度值6个平行面，称量试品(肝部、肾脏功能、全身肌肉)2g(精准至0.01g)于50mL聚丙稀离心管架中，添加混和放射性核素内标切削液100μL，冉添加2mL水，涡流混和1min。添加0.2％硫酸-乙腈水溶液10mL，200r/min震荡10min，添加2g氧化钠，再震荡10min，5000r/min离心式5min。将所有上清液迁移至15mL聚丙稀离心管架并40℃氮吹至约5mL，添加100mgPSA、80mgC18、30mgGCB，涡流混和1min，震荡10min，5000r/min离心式10min。取所有上清液至另一个15mL聚丙稀离心管架中，40℃氮吹至近干，1mL工业甲醇滴定剂，15000r/min离心式5min，上清液供上机操作测量。离子交换柱：AtlantisT3离子交换柱(2.1mmx150mm，3μm)；流动速度：0.3mL/min；柱温：40℃；进样量：10μL；流动性相：2.5mmol/L乙酸铵-甲醇溶液(A)(2.5mmol/L乙酸铵水溶液(B)；梯度方向过柱程序流程：0～3min，90％～40％B；3～12min，40％～10％B；12～14min，10％B；14～14.5min，10％-90％B；14.5～18min，90％B。电喷雾器离子源(ESI)；扫描仪方法：空气负离子扫描仪；检验方法：多反映检测(MRM)；喷雾器工作电压：3500V；蒸汽温度；290℃C；正离子传送管溫度：270℃；鞘气流动速度：30arb；輔助气流动速度：10arb；二级撞击气：氩气；撞击气工作压力：1.5mTorr；与此同时做空缺试验，均扣减本底值后测算同成品率及精度。

1.4数据处理方法

选用英国ThermoFisherScientific公司Xcalibur3.0手机软件、Origin8.0版本号开展数据处理方法。

2.結果与剖析

2.1色谱仪和质谱分析标准提升

2.1.1色谱仪标准提升

PFCs具备吸水性和疏水性及其一定的两性离子和正负极，有关规范及参考文献大部分采川较低硅甲基活力填充料的C18液相色谱仪柱分离出来、乙腈-乙酸铵溶液或工业甲醇-乙酸铵溶液流动性相梯度方向过柱，来完成这类物质的优良分离出来。本试验关键调查二种流动性相管理体系乙腈-乙酸铵溶液、工业甲醇-乙酸铵溶液对PFCs及放射性核素内标底敏感度差别。根据较为同样浓度值标液峰而积(见图1)发觉，二种流动性相梯度方向过柱标准下，15种化学物质峰形均锐利对称性。与乙腈-乙酸铵溶液流动性相对比，以工业甲醇-乙酸铵溶液为流动性相时，除PFBA峰总面积降低29％以外，别的14种化学物质的色潜纷纷总面积提高了22％～151％。因此 ，本试验挑选峰而积比较大、敏感度较高的工业甲醇-乙酸铵溶液做为流动性相管理体系。

13种PFCs及2种放射性核素内标物为羧基或磺酸盐，在流动性看中添加乙酸铵，能使水溶液维持一定的pH及电离度，能够合理地提高电喷雾器离子化响应值，并降低有机溶剂效用，改进峰形。但也是有研究表明，较浓度较高的的乙酸铵对质谱检测有极强的抑制效果。规范及参考文献中常用的乙酸铵浓度值为1～10mmol/L，本试验以工业甲醇和水为有机溶剂，各自配置同样浓度值的乙酸铵甲醇溶液及乙酸铵溶液。根据较为1、2.5、5、10mmol/L四个不一样浓度值情况下的检测結果(见图2)能够 看得出，PFOS和PFDoA在1、2.5mmol/L浓度值的峰总面积较高且基本上相同，其他13种化学物质均在乙酸铵浓度值为2.5mmol/L时，色谱仪峰总面积做到最高值。