为科学研究“两炖一停”烤制加工工艺烟叶胰蛋白酶活力和蛋白质含量变化规律与基本烤制转变的差别，设定基本烤制（对比）和“两炖一停”烤制2种烤制方法，科学研究烤制全过程烟草的胰蛋白酶活力和蛋白质含量变化规律。2种烤制方法烤制全过程中胰蛋白酶活力均呈升-降-升-降的“双锋曲线图”变化趋势，第一个最高值出現在变黄期，第二个最高值出現在定色期，以第一个最高值的酶促反应高些；蛋白质含量呈下降趋势，在变黄期迅速降低，定色期迟缓降低，干筋期转变并不大，均以变黄期为蛋白的关键溶解阶段，溶解力度均在80%之上。

2种烤制方法中“两炖一停”烤制2个最高值的酶促反应各自为208.5、199.26 U/mg，较对比高于19.46、30.63 U/mg，且最高值区段的酶促反应均值高些，延迟时间更长，最高值发生也较对比晚；蛋白溶解以“两炖一停”烤制的溶解力度更高，变黄期的溶解力度占总溶解力度的89.3%，较对比多8.5个点，烤后烟草蛋白质含量也更低。由此可见，选用“两炖一停”烤制的形式可提升烟草蛋白质酶的活性及延迟时间，进而更有利于蛋白溶解，降低烤后烟草的蛋白质含量。

前言

烟草烤制全过程是在酶参加下的身理生物化学转变全过程，而酶促反应的多少可以直接危害烟草含有物的溶解和转换，进而危害烤后烟草的成分成分。酶促反应除受鲜烟草素养危害，还遭受烤制全过程中温度湿度的危害。蛋白是烟草中主要的成分之一，对烟草品质有着关键的危害。现阶段基本烤制中相关烤制全过程中酶促反应或成分的探讨已经有一些报导，但在烤制全过程中蛋白质含量及胰蛋白酶活力科学研究的报导却很少，对基本烤制和“两炖一停”烤制方法的体系科学研究末见报导。小编较为基本烤制和“两炖一停”烤制在烤制全过程中蛋白质含量及胰蛋白酶活力的转变，致力于为“两炖一停”烤制加工工艺给予实验根据，为烟叶烤制技术性的改善给予参照。

1 原材料与方式

1.1 实验時间、地址

科学研究农业试验于2017年4—9月在黔南州龙里县湾滩河镇开展，房间内实验在贵州大学作物科学试验室开展。黔南州龙里县湾滩河镇属北亚热带季风湿润气候，海拔高度1480 m，土壤质地为黄壤、肥效中等水平，土壤层p H6.35，前茬空余。

1.2 实验原材料

烟叶种类为‘云雾87’，位置为中间叶。选用飘浮预苗，4月20日栽种，相对密度为16500株/hm2，施氮量为105 kg/hm2,N:P2O5:K2O为1:1:2.5，留叶数20片。完善采摘，中间叶主脉所有白，余脉1/3～2/3泛白，叶片5～6成黄。别的种植对策按本地高品质烟种植技术规定开展。

1.3 实验方式

实验设定2个解决，以基本聚集烤制为对比、“两炖一停”聚集烤制（变黄后半期不除湿）为解决，实际设定见表1。在烤制全过程中每过6 h抽样一次，测量烟草的蛋白质含量（抽样至168 h）和胰蛋白酶活力（抽样至120 h）。

1.4 测定法

挑选一切正常完善烟草衣杆烤制，每一次任意从对比和解决烘干房抽样15片（各层5片，即3次反复）。抽样后马上切掉叶子、叶基和主脉后按半叶法分成2份，一份放进包装袋放置-20℃自然环境中储存，用以测量胰蛋白酶活力；另一份放置烘干箱中在105℃结束15 min后，80℃烘干处理后储存，用以测量蛋白成分。抽样进行后统一送到贵州大学作物科学试验室开展测量，高锰酸盐指数选用凯氏定氮法测量[25]，蛋白质含量选用间接性法测算；胰蛋白酶活力选用紫外线酶活性测定[26]测量，常用胰蛋白酶测定试剂盒由南京建成生物技术研究室给予。

1.5 数据分析

数据信息选用Microsoft Excel 2019、SPSS 22数据信息统计分析软件开展剖析。

2 結果与剖析

2.1 烤制全过程中胰蛋白酶活力变化趋势

由图1由此可见，解决和对比烤制全过程中胰蛋白酶活力整体上的趋势分析一致，均展现出上升—减少—上升—减少的“双锋曲线图”，第一个最高值在变黄期(0～66 h)发生，第二个最高值在定色期(66～120 h)发生。对比第一个最高值酶促反应从18 h逐渐升高，在30 h做到极值后逐渐降低，42 h降至底点，这段时间酶促反应的平均数为81.47 U/mg；解决的酶促反应从18 h逐渐升高，在36 h做到极值后逐渐降低，48 h降至底点，这段时间酶促反应的平均数为99.17 U/mg。第二个最高值对比的酶促反应从60 h逐渐升高，在72 h做到极值后逐渐降低，78 h降至底点，这段时间酶促反应的平均数为98.22 U/mg；解决的酶促反应从66 h逐渐升高，在78 h做到极值后逐渐降低，90 h降至底点，这段时间酶促反应的平均数为114.27 U/mg。

从胰蛋白酶活力最高值较为，两个最高值均以解决的酶促反应高些，各自为208.5、199.26 U/mg，各自较对比高19.46、30.63 U/mg，但发生较对比晚；从两个环节均值看，也以解决的酶促反应高些，延迟时间更长，全部全过程解决的酶促反应均值为74.66 U/mg，高于对比20.26 U/mg。综上所述，2种烤制方法的酶促反应以“两炖一停”烤制的酶促反应高些。