2、蛋白酶响应面可靠性设计

（1）响应面设计方案及結果

响应面实验結果见表4，选用Des远nExpert8.0.6手机软件对表4中数据开展标准差、显著性分析，結果见表5。

以酶解時间、pH、溫度、加酶量为回应自变量，α-胃蛋白酶活力抑制率为响应值，根据响应面线性回归方程剖析得知，黎麦活性多肽液具备α-胃蛋白酶活力抑制率的多元化二次线性拟合线性回归方程为：

Y=44.09 2.53A一1.87B 4.39C 4.47D 1.86AB 1.61AC 7.67AD 9.20BC 1.90BD一4.19CD一9.11A²—12.84B²—1.78C²—9.79D²。

19CD一9.11A2—12.8482—1.78C2—9.79D2。

由表5得知，实体模型的P＜0.0001，表明实体模型重归差别极明显，失拟项P=0.8453＞0.05，不明显，表明拟合程度优良，能真正反应具体情况，实体模型靠谱；实体模型重归决定系数R²=0.9728＞0.9，表明α-胃蛋白酶活力抑制率結果与方程式预测分析結果具备一致性，实体模型相关性好。实验实体模型校准指数R_Adj²=0.9457，说明实体模型线性拟合程度高。表明有94.57％实验結果值可以用此实体模型来表述，因而結果靠谱，实体模型能够对α-胃蛋白酶活力抑制率值实现剖析和预测分析。由重归表达式中一次项系数得知，各要素对α-胃蛋白酶活力抑制率功效尺寸次序为；加酶量(D)＞溫度(C)＞酶解时问(A)＞pH(B)。

（2）响应面分析与标准提升

响应面曲线图剖析，各要素问等高线图和配对t检验见图6。

由图6得知，pH与時间、溫度与pH、加酶量与溫度配对t检验的显著性差异与表5中交互项P值的解析結果一致。a，c，e均呈椭圆型，说明要素问配对t检验明显，等值线的形态能够分辨配对t检验的高低，3组等高线图里加酶量与溫度配对t检验最好是，等值线中的曲线图紧紧围绕着响应面在中国问处产生端点，即抑制率最高值。a，c，e响应面图张口都朝下，伴随着每一个要素值的提高而响应值扩大，在做到响应值最高处后，伴随着要素值的增加而响应值减少，响应面的端点即是较大响应值。

经DesignExpert8.0.6手机软件剖析获得提升标准为：酶解時间2.22h、pH8.95、溫度60℃、加酶量0.53×10⁴U／g，在这里前提下，旷胃蛋白酶活力抑制率的基础理论最高值为47.82％，选用这一結果并联系实际标准，将酶解标准改成：酶解時间2h、pH9.0、溫度60℃、加酶量0.5×10⁴U／g，获得的检验结果显示为45.54％，与基础理论估计值基本一致，创建的建模能够比较好地体现黎麦活性多肽液具备抑止α-胃蛋白酶活力的工作能力，与此同时活性多肽得率为63.54％。

三、结果

以黎麦蛋白质为实验原材料，科学研究酶解后的活性多肽对α-胃蛋白酶活力的抑制率，挑选出最可用酶。在单要素酶解情况下，挑选酶解時间、pH、溫度、加酶量开展Box-Behnken试验设计，提升数据显示：加酶量和酶解溫度对α-胃蛋白酶活力的抑制效果比pH和酶解時间要好。实验结果显示：制取黎麦活性多肽的较佳获取加工工艺为：酶解时问2h、pH9、溫度60℃、加酶量0.5×10⁴U／g，在这里前提下α-胃蛋白酶活力抑制率为45.54％。为了更好地提升活性多肽液对α-胃蛋白酶的活力抑制效果，还需对酶解活性多肽液开展进一步的提纯解决。