2.2.3 固定化酶EC溶解酶的酒精耐受力

EC溶解酶的酒精耐受力在酒精饮料的使用中特别关键。从图6能够看得出，伴随着酒精摩尔分数的上升，分散酶和固定化酶EC溶解酶酶活均随着降低，但固定化酶EC溶解酶对酒精主要表现出优良的耐受力。在酒精摩尔分数为7％～25％时，同定化EC溶解酶酶活均能保存50％之上.同分散酶的酒精耐受力对比，转变有一定差别，基本推断此固定化酶方式对其酒精耐受力和酶活提升有一定危害。表明此固定化酶EC溶解酶与分散酶对比，在酒精摩尔分数相对性较低时能够维持相对性较高的酶活，适用酒精摩尔分数相对性较低的发醇酒精饮料。

2.2.4 固定化酶KC溶解酶的多次重复使用性

如图所示7所显示，在仿真模拟酒样对固定化酶EC溶解酶开展可重复性试验，数据显示，每一次运用后酶活均有降低。当多次重复使用8次之后，固定化酶EC溶解酶酶魅力保存在50％之上，因而在8次前应用成效不错。

此結果与文献资料报导的GO-CS复合型同定酸碱性酶应用10次时的酶活80％对比，可应用频次稍显缺点圈，但就所得的固定化来讲，依然能够考量将应用频次尽可能操控在8次之内以获取更快的实际效果。

2.2.5 固定化酶EC溶解酶的贮存可靠性

固定化酶EC溶解酶在不一样存储溫度随储藏时間的酶活转变如图所示8所显示。在4℃标准下，酶活随时随地问慢慢减少，酶活减少速度在1～3周和4～6周的改变都较稳定，而在3～4周的改变较大：且储藏6周以内，酶活损害不够30％。在20℃标准下，酶活随時间增加逐步减少，至第5周时基本上维持不会改变，但在储藏6周以后，酶活仅做到60％。表明储藏溫度相同定化EC溶解酶的酶活有一定危害，但并不是唯一要素。因而在该试验标准下，尽可能将固定化储藏在4～20℃，但根据固定化适宜反映溫度和出自于经济发展节省层面的考虑到，以20℃做为最好储藏溫度标准。

2.3 固定化对“美乐”红酒的危害

2.3.1 固定化在“美乐”红酒中的可靠性

如图所示9所显示，伴随着静放時间提升，分散酶和固定化酶EC溶解酶酶活均出现下降趋势，但存全部流程中，固定化酶活均高过分散酶酶活。当静放96h时，固定化酶活与分散酶酶活相距较大，相比于最初酶活差别，中后期的差别更高，可能是南于同样酶量的标准下，最初分散酶更易于与底物触碰，而随之时间流逝，固定化因为媒介的保障功效，仍能渐渐地表明出较高的酶促反应。静放144h以前，固定化酶活的损率在50％下列，表明此酶能够融入“美乐”红酒的微自然环境，用以红酒中EC的除去。

2.3. 2固定化对“美乐”红酒中EC的污泥负荷

“美乐"红酒试品中加上相等酶活的固定化酶EC溶解酶和分散酶一段时间后，试品中EC浓度值慢慢减少。

从图10能够看得出,试品里加酶解决后,解决组的EC浓度值均少于对照实验，解决组的EC污泥负荷高过对照实验，表明不论是分散或是固定化酶EC溶解酶的解决,均使“美乐”红酒中EC浓度值获得了减少，但分散酶酶法除去EC的成效要好于固定化解决法。在该试验标准下,固定化酶EC溶解酶对“美乐”红酒中EC的污泥负荷可以达到30.90%,是分散酶的81.53%。

2.3.3 固定化对“美乐”红酒挥发物有机物的危害

红酒的口味并不是单独出现的，只是由醇、酯、酸、醛、酮、三萜类和C13-萜烯类物质互相融洽而发生的，他们一同产生了红酒香味的构成成份。对“美乐”红酒中香味化学物质以及相对性成分开展了明确和定性分析。

对照实验和解决组的红酒中挥发物口味成分的相应成分如表1所显示，在3种处理方法下的红酒巾，共监测到29种香味成份，包含12种脂类、9种醛类、3种有机物和5种醛、酮、酚类化合物。经剖析得知，不一样解决组中各挥发物有机物的相应成分中间无明显差别，可是相对于对照实验，解决组的有机物类型均有一定的降低，在其中固定化解决组降低了8种化学物质，而分散酶解决组降低了12种化学物质。表明酶解决对红酒巾挥发物有机物的品种总数有一些危害，但对化学物质的相应成分危害不明显，并且，固定化处理方法对红酒更为友善。对比对照实验.酶解决组里的成分均发生了总数的降低，但消退的化学物质并不相同，固定化解决组降低的成分包含：香茅醇、正癸醛、己酸乙酯、心酸乙酯、甲酸异戊酯、甲酸己酯、甲酸苯乙酯和等保。而分散酶解决组降低的化学物质分别是香茅醇、卢一大马士酮、糠醛、正癸醛、己酸乙酯、苯乙酸丁酯、甲酸异戊酯、甲酸苯乙酯、丁二酸二乙酯、2，3一丁二醇、等保、1一己醇。表明不一样种类的酶解决对红酒的危害不一样，但充分考虑分散酶造成芬芳味和果香气化学物质的损害更高，F向于在考虑到口味多元性时要防止不愉快口味的发展趋势，因而提议对“美乐”红酒应用固定化酶EC溶解酶开展解决。

除此之外，不一样解决组测得的挥发物口味化学物质的构成也是有显著不一样。表1和图11表明了“美乐”红酒中不一样酶处理方法下关键挥发物香味成份(醇、脂类、酸和醛)的变化趋势。

南C6化学物质、挥发物酚类物质和苯类物质构成的香味成份在“美乐”红酒中伴随着酶处理方法的差异而呈现不一样的发展趋势。酶解决后醛类和代烃占有率减少，而脂类和碱类均有所增加，别的类基本上维持不会改变，说明不一样的酶处理方法对挥发物香味化学物质造成了一定危害。虽然酶处理方法对红酒巾挥发物有机物的相应成分沒有明显危害，但造成了香味化学物质类型的降低和香味化学成分的更改，且分散酶对其不良危害要超过同定化酶。因而，在大家接纳口味有一定的更改的条件下，同定化EC溶解酶更合适用以“美乐”红酒。

3 总结

根据对壳聚糖与戊二醛的化学交联标准开展提升后发觉，以摩尔分数5％的戊二醛水溶液作偶联剂，化学交联反映开展8h时，媒介对酶的固定量做到较大。以后对EC溶解酶的酶学特性进行剖析，获得以下結果：固定化酶EC溶解酶的适宜气温是42℃，在这里溫度下置放24h时相对性酶活达60％之上；其适宜DH是3.6，在这里前提下置放24h的相对性酶活超过60％：在摩尔分数7％～25％酒精下，酶活均保证在50％之上，表明该固定化的酒精承受覆盖面广，催化剂的活性高：该酶在多次重复使用8次能，酶活还维持在50％之上.并且各自在4℃和20℃下储藏6星期过后的酶活损率不够30％币H40％。最终，选用ATPS融合GC-MS检验不一样酶解决的“美乐”红酒中包含的EC，获知同定化EC溶解酶的EC污泥负荷达30.90％，是分散酶的81.53％。EC溶解酶的处理方法对红葡萄酒中挥发物有机物的相应成分沒有明显危害，仅仅造成了香味化学物质类型的降低和香味化学成分的更改，但固定化对挥发物口味成分的不良危害远小于分散酶。