目地研发冰冻人血清蛋白α-胃蛋白酶催化剂的活性浓度值备选二级标准化学物质，做为数值传播的规范。方式参考JJF 1343—2012《标准物质定值的通用原则及统计学原理》和JJF 1644—2017《临床酶学标准物质的研制》规定开展均衡性、可靠性、公差配合点评；协同6家根据我国质量认证国家认可委员会（CNAS）认同的校正试验室对国家标准物质开展时间常数，鉴定其均衡性、可靠性和时间常数引进的测量不确定度，测算拓展测量不确定度。結果国家标准物质匀称性和可靠性均优良，互通性点评数据显示，4个基本监测系统的精确测量值均坐落于95%可信区间内。时间常数結果：水准1为（106.3±4.3）U/L(k=2)，水准2为（268.1±7.9）U/L(k=2)。结果研发的冰冻人血清蛋白α-胃蛋白酶催化剂的活性浓度值备选二级标准化学物质标识值靠谱，匀称性、可靠性不错，具备公差配合。

血清蛋白、小便α-胃蛋白酶精确测量是医学上最常见的试验室检查指标值之一，在胰腺疾病，尤其是急性胆囊炎的确诊、功效观查中有着关键功效。胃蛋白酶是急性胆囊炎初期检测指标值，为处理医学检验血清淀粉酶精确测量效果的准确性，完成精确测量效果的可溯源性和医学检验結果相比、双边协定，降低反复查验，缓解病患压力，本试验室制取了两个水准的冰冻人血清蛋白α-胃蛋白酶催化剂的活性浓度值备选二级标准化学物质。

1原材料和方式

1.1仪器设备与实验试剂

cobas 8000自动式生化仪（法国罗氏公司）及配套设施实验试剂、校正品和质控品，U-3310分光分光光度计（日本日立企业）。参照方式实验试剂：N-2-甲基乙基哌嗪-N'-乙基磺酸（生产批号为017K5410，英国Sigma企业），4,6-亚乙基-4-磺酰氯-α-（1->4)-D-麦芽糖七糖（生产批号为121214A，北京市阿匹斯企业）。有证参照化学物质IRMM/IFCC-456（欧盟国家参照化学物质和精确测量研究所）。

1.2国家标准物质样版制取

挑选外型清澈，无脂血、新生儿黄疸和溶血症的样版。乙肝病毒感染乙肝表面抗原、梅毒螺旋体抗原、丙肝病毒抗体、人们免疫缺陷病毒抗体检测阴性。经2次杀菌过虑后，散装至无菌检测搜集管内，每一个1 m L，共300支。制取了两个水准的国家标准物质，可-70℃冰柜储存。

1.3国家标准物质点评

依照JJF 1343—2012《标准物质定值的通用原则及统计学原理》和JJF 1644—2017《临床酶学标准物质的研制》规定开展均衡性、可靠性、公差配合点评，全部样版均选用cobas 8000自动式生化仪精确测量。

1.3.1匀称性检测

取15支样版，在一个批号内进行精确测量，每一个样版反复精确测量3次。結果选用单要素方差分析开展点评。方差分析結果中的小组之间标准差MSamong>组内方差MSwithin时，样版间匀称性的相对标准偏差sbb计算方法为：

式中ubb,rel为α-胃蛋白酶因为样版不均衡性引进的测量不确定度份量。

1.3.2可靠性点评

选用同歩可靠性开展评定，結果选用多元回归分析的t检验开展点评，基本上实体模型为：Y=β0 β1X，式中β1、β0为回归系数，X为時间，Y为国家标准物质的特征值。（1）短期内可靠性点评。点评运送对国家标准物质未确定特点值的危害。各自于第一、2、三天从冰柜中取下样版，放进液态氮冷藏包装木箱，与第5天从存储电冰箱中拿出的样版与此同时开展精确测量。每一个水准一个监控点提取2支样版，4个监控点累计8支样版。在一个批号内进行精确测量，每一个样版反复精确测量3次。（2）长期性可靠性点评。点评国家标准物质-70℃储存一年的可靠性。各自于第0、7、31、90、182天从-70℃冰柜中取下样版，放进液态氮瓶中，与第365天从-70℃冰柜中拿出的样版与此同时开展精确测量。每一个水准一个监控点提取3支样版，共6个监控点，累计18支样版，在一个批号内进行精确测量，每一个样版反复精确测量3次。（3）应用时可靠性点评。点评国家标准物质应用时存储于电冰箱（2～8℃）或室内温度（20～25℃）的可靠性。各自于24、6、4、2 h从-70℃冰柜中取下4支样版，电冰箱或室内温度各置放2支，与精确测量前从-70℃冰柜中拿出的样版与此同时开展精确测量。每一个水准一个监控点提取4支样版，电冰箱或室内温度自然环境各置放2支，开展可靠性检测，共五个监控点，累计20支样版。在一个批号内进行精确测量，每一个样版反复精确测量3次。（4）可靠性引进的测量不确定度。由可靠性引进的测量不确定度计算方法为：us=s（β1）×X，式中us为由可靠性引进的测量不确定度，s（β1）为β1的相对标准偏差，X为给出的保留限期。

1.3.3公差配合点评

公差配合选用最小二乘法开展多元线性回归剖析。（1）对照品监测系统。试验室参考2006年国际性检验医学溯源性协同联合会建议的α-胃蛋白酶参照精确测量程序流程（37℃）创建一级参照方式。（2）临床医学点评监测系统。系统软件1：法国罗氏公司cobas 8000自动式生化仪及配套设施实验试剂（AMY384295）、校正品（cfas,lot:305596）和精确测量程序流程；系统软件2：英国梅里埃库尔特企业A U 5 8 0 0自动式生化仪及配套设施实验试剂（AMY6159）、校正品（lot:F6662）和精确测量程序流程；系统软件3：法国罗氏公司cobas 8000自动式生化仪、深圳迈瑞生物医疗电子器件股权有限责任公司实验试剂（AMY142819001）、校正品（059318006）和精确测量程序流程；系统软件4：法国罗氏公司cobas 8000自动式生化仪、四川迈克生物股权有限责任公司实验试剂（AMY0518061）、校正品（Lot:366059）和精确测量程序流程。（3）样版。共20份新鮮单肾源人血清蛋白样版，浓度值范畴遮盖国家标准物质浓度值范畴，每一个样版反复精确测量2次。

1.4时间常数

1.4.1时间常数方式

时间常数根据论文参考文献开展（同对照品监测系统）。两个水准的国家标准物质每日各自精确测量3次，持续精确测量3 d，共9个检测結果。

1.4.2时间常数方法

由6家根据我国质量认证国家认可委员会认同的参照（校正）试验室协同时间常数。

1.4.3时间常数以及引进的测量不确定度测算

依据测量数据信息听从标准正态分布情况，小组之间数据信息是不是为等精密度开展测算。

1.4.4結果检测

选用Shapiro-Wilk开展标准正态分布检测，选用坦斯布斯（Grubbs）法开展同组异常值检测和每组数据信息均值显著性检验，小组之间数据信息等精密度检测选用科克伦（Cochran）法。

1.4.5指标值的测量不确定度鉴定

国家标准物质的生成规范测量不确定度（uCRM）计算方法为：

式中ub b为由甁间不均衡性引进的规范测量不确定度，ults为由长期性（一年）多变性引进的规范测量不确定度，usts为由短期内多变性引进的规范测量不确定度，uchar为由时间常数引进的规范测量不确定度。拓展测量不确定度（UCRM）依照公式计算：UCRM=生成规范测量不确定度（uCRM）×κ测算，式中κ为包括因素，这里κ=2（置信水平为95%）。