（4）黑豆活性多肽抗氧化与酶解時间的关联

根据单要素试验的結果，能够挑选出各要素的三个水准。因此在这个基础以上，运用数据分析手机软件创建4要素3水准的Box—Behnken实体模型，开展回复面可靠性设计试验标准开展试验，更改酶解時间結果见4所显示。

由图4得知，当反应速度不超过2h，DPPH清除率与气温正相关，当响应时间超出2h，DPPH清除率与溫度反比，在2h时DPPH清除率做到最高值。当水解反应的时间段过短时间，黑豆蛋白质生物大分子沒有水解反应成具备小分子水生物活性的生物活性肽，因此水解反应物DPPH的清除率较小。而水解反应的时间段太长则会造成生物大分子蛋白过多水解反应成碳水化合物或是是不再具有生物活性短肽链的化学物质。

2、应面试验結果

（1）线性回归方程实体模型方差分析

单要素试验探讨了各种要素对黑豆活性多肽抗氧化的危害，为了更好地全方位调查影响因素，仍需明确酶解時间、酶解溫度、pH、酶浓度值对黑豆抗氧化性肽的耐热性的危害。故选用再次用回应法对黑豆抗氧化性肽获取的技术完成提升。以酶解溫度(X₁)、酶解pH(X₂)、酶浓度值(X₃)、酶解時间(X₄)为变量，DPPH清除率的响应面试验結果见表2。溫度(X₁)、酶解pH(X₂)与酶浓度值(X₃)、酶解時间(X₄)为变量，DPPH清除率为回复值的响应面试验結果见表2。

依据响应面实验方案设计以及试验結果，必须创建线性回归方程实体模型，用以分辨各要素两者之间的配对t检验是不是明显，为用以分析和剖析黑豆活性多肽抗氧化的转变，因此还需分辨其偏差的尺寸。即试验拟合程度与在最好情况下抗氧化的一致水平。黑豆活性多肽抗氧化的线性回归方程实体模型的方差分析如表3所显示。

由表3得知，该回归分析P＜O.000l，方程式实体模型做到极明显，失拟项P=0.1471＞0.05，不明显，表明实体模型创建恰当。该回归分析的总决策系R²=0.9568，表明方程式拟合程度不错，试验偏差小，故该线性回归方程实体模型创立，可以用此实体模型对黑豆活性多肽的抗氧化开展解析及预测分析。从而实体模型获得的此线性回归方程为：Y=45.24—6.00X₁ 1.47X₂—1.35X₃ 0.36X₄ 1.81X₁X₂—2.60X₁X₃ 1.06X₁X₄ 0.20X₂X₃一0.17X₂X₄ 0.14X₃X₄—4.98X₁²—0.97X₂²—0.70X₃²—0.90X₄²。

（2）回应斜面結果剖析

响应面图可反馈出不同要素对黑豆活性多肽抗氧化的危害，依据斜面图的张口房屋朝向及斜面样子分辨在试验范畴内是不是存有最值、各要素两者之间的相互影响是不是明显。

融合表3、图5及图6可看得出，危害DPPH氧自由基清除率的顺序为：溫度(X₁)＞pH(X₂)＞酶浓度值(X₃)>酶解時间(X₄)，X₁、X₂、X₃、X_1³项做到互极明显水准(P＜0.01)，X_1²、项做到明显水准(P＜0.05)。响应面的最佳标准：溫度43.47℃，pH为9.19，酶浓度值为6.51％，水解反应時间为2.22h，DPPH氧自由基清除率47.14％。

3、认证试验

为了更好地认证响应面結果的稳定性，依据响应面提升出的最好加工工艺开展三次认证试验。具体取得的黑豆活性多肽DPPH清除率的平均数是47.03％，与剖析值相距0.23％。与响应面估计值比较符合，表明响应面得到的最佳标准具备可行性分析。

三、结果

根据响应面提升试验剖析出危害黑豆抗氧化性肽的制取要素，这四个要素对黑豆抗氧化性肽获取的危害水平次序为：酶解溫度＞pH＞酶浓度值＞酶解時间。本试验得到的黑豆抗氧化性加工工艺标准为：酶解溫度43.47℃、pH9.19、酶浓度值6.51％、酶解時间2.22h，在这里加工工艺标准下取得的黑豆抗氧化性肽对DPPH清除率的平均数为47.03％，与手机软件得出的标准偏差相距0.23％。本研究对黑豆抗氧化性肽获取标准完成了提升，且黑豆活性多肽的抗氧化为黑豆活性多肽在抗氧化食品、保健产品等领域的开发设计及药学科学研究带来了更加高效的根据。