2.2 提纯有机溶剂对尼古丁的危害

尼古丁是强正负极的有机化合物，可溶强电解质和工业甲醇，该实验选择不一样含量的硫酸、氢氧化钠溶液、氢氧化钠和工业甲醇调查不一样有机溶剂的提取实际效果（表2）。

由表2得知，不一样含量的甲醇溶液中尼古丁成分整体高过氢氧化钠溶液水溶液，与氢氧化钠和硫酸提纯实际效果无显著性差异。依据许燕娟等的分析結果，碱性溶液的硬度对尼古丁提纯率要比较大危害，同样浓度值下氨溶液比氢氧化钠溶液水溶液检验到的黄酮类型多。相近地，Li等用不一样浓度值氢氧化钠提纯烟草中的黄酮，发觉6%氢氧化钠好于其他浓度值，也罢于氢氧化钠溶液水溶液。综合性充分考虑甲醇溶液对比氢氧化钠和盐酸溶液有益于试品溶剂的存放和液相色谱仪柱及其具备不错的抗菌性，因而，选用5%工业甲醇做为事后实验的提纯有机溶剂。

2.3 提纯時间对尼古丁提纯率的危害

超声波、微波加热等常见于輔助提纯实验，殊不知他们在提升提纯率的与此同时，也会产生大量残渣，这针对选用紫外光光度法检验十分不好，因而，挑选比较柔和的常温下波动法开展提纯。由表3中还可以看得出，伴随着提纯時间的增加，提纯率上升，而在25、30 min时无明显差别，为保险起见选用30 min做为提纯時间。

2.4 尼古丁成分测量公式计算的讨论与线性拟合

原公式计算以236和282 nm为梯状的中位线法推断残渣在259 nm处的影响。由图1能够看得出，因为残渣的影响，提取液的紫外线消化吸收低谷由尼古丁的236 nm红挪到240～242 nm处，而与之等间距的是276～278 nm。但从图1中还可以看得出，在光波长低于278 nm时，4种种类试品溶剂的紫外线OD值与光波长产生的切线斜率比较大，为减少偏差而检验279～282 nm处OD值。因而，以240、259和282 nm的OD值用以新公式计算的线性拟合。尼古丁成分以HPLC法检验结果显示为标准。

从表4中OD值与尼古丁成分的关联性結果还可以看得出，尼古丁成分与240 nm关联性贴近明显水准，这是由于尼古丁在240 nm有紫外线消化吸收，但又有残渣影响导致的；与259 nm处OD值关联性做到明显水准，这就是选用该方式基本原理所属。尼古丁与282 nm处的OD值关联性较弱，这是由于尼古丁在该点无消化吸收（图1），其OD值是由于残渣的影响。而试品水溶液在240、259和282 nm处的OD值中间呈极明显关联性，这正好表明残渣对这3个光波长处的OD值危害一致，这恰好是原公式计算创建的基本。

以20个烟叶试品在240、259和282 nm处的OD值为变量，以HPLC检验尼古丁成分为自变量用SPSS手机软件线性拟合重归获得线性拟合方程式为：

C=（0.080 7 0.426 9×A259 0.473 9×A240 -0.631 2×A282）V/m

式中，C为尼古丁成分/%，A259，A240和A282分别为试品溶剂的OD值，V为试品水溶液容积/L，m为烟样品质/g。

再各自以两个公式计算对剩下5七个烟草试品尼古丁成分开展测算，随后各自将数值除于HPLC检验結果，则比率越贴近1表明检验越精确。由图3能够看得出，所有试品的原计算公式結果与HPLC检验結果的比率基本上呈标准正态分布，且在0.75～1.25的一部分占49.12%；而烟叶试品的比率在0.75～1.25的占55.88%，市场集中度略微提高；针对晾干烟试品，其比率也呈标准正态分布，但市场集中度较烟叶低，0.75～1.25的仅占39.13%。所有试品的线性拟合计算公式結果与HPLC检验效果的比率基本上呈标准正态分布，0.75～1.25的占61.40%，高过原公式计算；烟叶试品的比率在0.75～1.25的占76.47%，市场集中度有大幅度提高；针对晾干烟试品其市场集中度较低，比率在0.75～1.25也是仅占39.13%，可是比率在0.5～0.75和1.25～1.60的各自由17.39%、21.74%提高至26.09%、30.43%。能够看得出，两个公式计算的结论均是烟叶市场集中度高过晾干烟，这是由于：1） 2种办法的创建基本为烟叶，2） 晾干烟的杂物对OD值的影响有区别。

3 探讨与结果

4种种类烟草试品的紫外线扫描仪表明，3种晾干烟的图型一致而与烟叶有区别，主要表现为峰时比率前三者比较贴近，及其消化吸收光波长超过276 nm后的趋势呈迟缓降低而烟叶的紫外线消化吸收基本上不会改变，表明不一样香烟种类的杂物对吸附的危害有一定的差别。根据对不一样提纯有机溶剂的调查发觉，工业甲醇、硫酸和氢氧化钠提纯高效率较高，挑选工业甲醇做为提纯有机溶剂，是由于不错的抗菌性，而且有益于试品溶剂的储存及其对离子交换柱友善。

原公式计算创建的根基是朗伯比尔基本定律即尼古丁成分与OD值正相关。可是在具体测量全过程中，因为测试仪器等的偏差，标曲或是拟合曲线一般呈线性相关并非正比例关联。此外，该实验紫外线扫描仪图和参考文献中都表明尼古丁在236 nm上有一定的紫外线消化吸收，而不是无消化吸收，因此无法将236 nm处的OD值所有做为残渣。试品水溶液在240、259和282 nm处的OD值中间存有极明显关联性表明残渣对这3处的OD值危害比较一致，这恰好是2个公式计算创建的基本。根据2个公式计算的数值与HPLC結果的比率遍布能够发觉，针对烟叶试品，新线性拟合公式计算的准确度较原公式计算有大幅度提高；而针对晾干烟试品则沒有显著提高，这是由于2个公式计算的创建均是以烟叶为基本而创建的，殊不知晾干烟的残渣与烟叶不一样，这在紫外线扫描仪图中也有一定的体现。下一步将整理大量晾干烟试品，以创建更适用他们的计算方法。