(3)规范曲线方程
选用明确的色谱仪标准,各自对不一样浓度值索马甜标液开展测量,以规范溶液的浓度为横坐标轴,相匹配的峰总面积为纵轴,创建标曲,結果如图所示3所显示。所得的索马甜规范曲线方程为Y=3.62568X-47.04715,相关系数r为0.9983,说明在10~500mg/L浓度值范畴内其线性相关优良。
(4)方法检出限及定量限
反复测量20次含有10mg/L索马甜的栽培基质试品,以結果相对标准偏差的3倍测算出方式的方法检出限为1.6mg/L,以結果相对标准偏差的10倍测算出定量限为5.3mg/L,说明该办法能达到食品类中甜味素的检查规定。
(5)利用率和精度
选用文中所确立的办法对市面上的15个批号的饮料类商品(包含炭酸类饮品可口可乐、可乐,茶类饮料绿茶、绿茶叶、花草茶,果肉饮料,维他命饮品)开展剖析检验,均未发觉索马甜的验出,与其说商品标签成份中未明确应用索马甜的状况一致。
为认证办法的可行性分析,进一步对饮品试品开展加标实验。在这里全过程发觉,立即向各种饮品中添加索马甜,均没法验出,剖析其根本原因可能是因为各种饮品中高浓的糖成分造成蛋白质聚沉所致使的,因而,加标回收实验均是在对饮品开展10倍稀释液后的根基上加上。不一样试品的索马甜加标实验超高效率液相色谱仪結果如图4所显示,索马甜加标回收率及精度实验結果见表1。
依据表1結果,不一样试品索马甜加标回收率在82.8%~102.3%,相对性相对标准偏差均在6%之内,说明该办法有着优良的准确性和可重复性。
2、SDS-PAGE统计分析方法的创建
SDS-PAGE是剖析蛋白常见的方式 ,可以完成判定及半定量分析。配置不一样含量的索马甜蛋白质水水溶液,其SDS-PAGE結果如图所示5所显示。
由图5能够看得出,索马甜蛋白质杂带超出20kD,与资料中消息的相对分子质量22kD尺寸符合,伴随着含量的扩大杂带色调慢慢加重、杂带变大,在其中浓度值为10mg/L时,蛋白质杂带若隐若现,浓度值为提升至25mg/L时,杂带已更为清楚、显著,不难看出,SDS-PAGE法达到GB2760-2014较大容许需求量0.025g/kg的剖析规定。
对各种饮品开展10倍稀释液后任意加上不一样浓度值索马甜标液,依照上述情况的电泳分析方式实现解决并电泳原理,其效果如图所示6所显示。由图上能够看得出,各加标试品电泳条带与索马甜规范试品一致,不难看出运用SDS-PAGE法可以完成对饮品中索马甜开展剖析。
三、结果
本毕业论文各自根据超高效液相色谱色谱分析和SDS-PAGE法创建了饮品中索马甜的剖析测试标准。根据试品加标试验,结果显示这两种方式均可完成对饮品中索马甜的检验,其敏感度都可以达到GB2760-2014中较大限制值应用的检查规定。除此之外,针对比较繁杂的栽培基质试品,根据选用这两种办法开展互相证明,可以得到更加稳定的結果。