如图2所显示,当杜蛎发醇培养液的接种量为4%时,羟基态氮的成分最大,可是蛋白质含量未做到最少。接种量在持续提升的与此同时,羟基态氮和蛋白二者的成分迈向都展现减少发展趋势。这有可能由于在接种量过低时,纳豆激酶枯草芽孢菌繁育比较慢,产酶偏少;而当菌苗注射过多时,菌苗繁育过快,相对密度过大,造成O2触碰不够,造成新陈代谢物质较少。并且牡蛎肉做为纳豆激酶枯草芽孢菌繁育新陈代谢的关键营养成分栽培基质,在其中充足的蛋白被纳豆激酶枯草芽孢菌本身代谢的胰蛋白酶转化成寡肽和碳水化合物,促使发酵物中包含充足的羟基态氮。而当发酵物中小分子活性肽和碳水化合物成分与蛋白质含量相距较多时,纳豆激酶枯草芽孢菌会首先耗费小分子水化学物质,进而造成当接种量太多时蛋白与羟基态氮的成分均随着慢慢减少。说明在接种量2%~6%中间时,羟基态氮处在成分最大期。
如图所示3所显示,当接种量固定不动为4%时,发酵时间在12h~48h区域内,羟基态氮的占比在持续提升,在发酵时间为48~60h时稍有降低,可能是因为纳豆激酶枯草芽孢菌耗费蛋白的一起逐渐运用小分子水的碳水化合物造成,也是有有可能是由于胰蛋白酶魅力在发醇48h时到达较大,发酵时间是危害纳豆激酶枯草芽孢菌产酶的主要要素,在产酶总产量做到最高值以后再次发醇很有可能会造成胰蛋白酶酶活降低。在12h~60h期内,蛋白的占比在持续降低。在36h~48h期内羟基态氮成分与蛋白质含量的转变放缓,这时的纳豆激酶枯草芽孢菌在水解反应蛋白和耗费碳水化合物的环节中处在稳定平衡期。纳豆激酶枯草芽孢菌产酶最大值后应先终止发醇,不然酶魅力会发生下降状况。因而,在固定不动标准接种量为4%和发酵时间48h下开展后期实验。
2、正交实验提升发醇标准
在固定不动料液比l:4(g/mL),发醇温度37℃和葡萄糖水加上量2%的根基上,对单要素实验的信息效果开展解析并选择适合的发醇标准范畴,以发醇pH、接种量、发酵时间为首要要素,并以测量的羟基态氮成分做为参照,开展三要素三水准L9(33)正交和提升实验,实际试验方案和結果见表1。
由表一分析得知,以羟基态氮成分为指标值,各要素的危害先后为A>B>C,即接种量对羟基态氮成分的危害较大 ,次之是发酵时间,发醇pH对羟基态氮成分的危害最少。由正交实验結果剖析明确最好提升加工工艺标准:A3B3C2,即发醇pH为7,接种量为6%,发酵时间为48h。
由表2方差分析得知,本次实验的三个要素中,接种量对羟基态氮成分具备显著性差异危害(P<0.05),发酵时间和发醇pH对实验結果无显著性差异危害(P>0.05)。
3、认证实验
为认证正交实验所得的结论的稳定性,在所述最好发醇加工工艺标准下开展三次平行面实验并测量发酵物中羟基态氮成分。经测量,所得的发酵物中羟基态氮成分为0.785mg/mL,与正交实验結果贴近,确认实验結果靠谱。
三、结果
本实验以廉价选购销售市场击败的杜蛎废弃物做为发醇关键原材料,用纳豆激酶枯草芽孢菌对其开展发醇,能够提升杜蛎的使用使用价值。固定不动料液比1:4,发醇温度37℃和葡萄糖水加上量2%,根据单要素实验选择适合发醇标准范畴:发醇pH为6~8,接种量为2%~6%,发酵时间为24h~48h。在这个基础上,根据正交设计提升实验明确纳豆激酶枯草芽孢菌发醇杜蛎的较佳发醇标准为:发醇pH7,接种量6%,发酵时间48h,这时发酵物中羟基态氮的成分做到0.791mg/mL。
本实验的发醇结果显示,纳豆激酶枯草芽孢菌能够用以杜蛎的发醇,为水产品生物的使用带来了理论基础,为蛋白质低值化保证了根据,与此同时为海产品的研发给予新的方位,灵活运用销售市场击败的杜蛎边角余料。并且,发醇水解反应液氯激发态氮成分丰富多彩,水解反应液历经浓缩获取还可以制取碳水化合物原浆、油类、碳水化合物润喉片、碳水化合物护肤产品、碳水化合物添加物等,本科学研究为碳水化合物商品的制作带来了根据。